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SPF級實驗動物大鼠小鼠病原檢測中的熒光定量PCR技術的應用
發(fā)布時間： 2026-01-04 點擊次數： 102次近幾年來,PCR技術不斷發(fā)展,它以準確、快速、便捷等優(yōu)點廣泛應用在科學研究的各個領域。特別是熒光定量PCR技術，高靈敏、快速、特異性高等特點。實驗大鼠小鼠在基礎生命科學和藥物學方面的應用極為廣泛，科學的發(fā)展和更新的研究目標對實驗動物的質量提出了越來越高的要求。國標GB14922—2022中明確規(guī)定了大鼠小鼠病原微生物需要排除的項目。這些病原微生物會影響到實驗動物的健康或者實驗結果。方便快捷的檢測方式有助于提高檢測的準確性和成功率。PCR技術越來越多的應用于實驗動物病原微生物的檢測。
SPF級實驗動物根據國家標準GBGB 14922—2022中沙門氏菌、支原體、綠膿桿菌、肺炎克雷伯桿菌、嗜肺巴斯德桿菌等都是必檢的病原菌。細菌和真菌的檢測中,傳統(tǒng)的細菌學培養(yǎng)方法需要培養(yǎng)基培養(yǎng)，富集培養(yǎng)、形態(tài)特征觀察、生理生化反應以及血清學鑒定等過程,操作復雜、耗時費力,對實驗人員的技術要求也很高。對于病毒來說，呼腸孤病毒Reo-3、仙臺病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV、漢坦病毒HANT都是必須要排除的病毒。ELISA是病毒檢測的好方法，但是因為抗體產生相對滯后，并且對于免疫缺陷鼠無法產生抗體，所以需要更靈敏的檢測方案。目前,越來越多的研究者使用PCR技術檢測這些病原菌和病毒。
熒光定量PCR成為用于檢測病毒感染的常用的方法。不同的熒光標記物也使得多重檢測成為可能，比如一個反應體系內可見檢測多重熒光FAM、HEX、ROX 熒光，每種熒光探針標記1-3種病毒，從而可以實現一個孔中多種病毒的檢測。
四款聯檢試劑盒：國標病毒必檢八項、國標病毒選檢六項、國標病原菌必檢八項、國標病原菌選檢七項。聯檢試劑盒中一個熒光通道可以同時檢測 2-3 種病原體，但是不進行具體病原的鑒定，也就是說一旦某個熒光通道有信號陽性，那么該熒光對應的這 2-3 種病原體都有可能是陽性。
翼和生物還開發(fā)了十款鑒定試劑盒。鑒定試劑盒中一個熒光通道只鑒定一種病原，所以可以通過熒光信號直接判斷感染的具體病原體。
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