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小鼠諾如病毒MNV的qPCR檢測方法
發(fā)布時間： 2026-01-14 點擊次數(shù)： 82次中國實驗動物學(xué)會2017年5月發(fā)布的團(tuán)標(biāo)T/CALAS 22—2017 《實驗動物 小鼠諾如病毒檢測方法》描述了小鼠諾如病毒的檢測方法。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小鼠諾如病毒(MNV)的檢測方法、試劑等本標(biāo)準(zhǔn)適用于小鼠諾如病毒的檢測。其中方法上包括ELISA、普通PCR、實時熒光定量PCR等方法。
小鼠諾如病毒 ( Murine Norovirus, MNV )生物學(xué)特點
GB14922—2022 《實驗動物 微生物、寄生蟲學(xué)等級及監(jiān)測》中規(guī)定的免疫缺陷鼠中必須排除的病毒。小鼠諾如病毒 ( Murine Norovirus, MNV ) 也是目前實驗小鼠中感染率較高的一種病毒，有些實驗動物設(shè)施的感染率非常高。MNV會激活免疫系統(tǒng)，影響抗體檢測。小鼠諾如病毒是國標(biāo)中免疫缺陷小鼠的必檢項目。
小鼠諾如病毒屬于杯狀病毒科 諾如病毒屬，與人源諾如病毒的生物學(xué)及遺傳相似。2003年該病毒從小鼠中發(fā)現(xiàn)，后來受到越來越多的關(guān)注，關(guān)于諾如病毒感染的研究也逐步受到重視。鼠的MNV能通過接種細(xì)胞進(jìn)行增殖，但是人類的諾如病毒不能通過細(xì)胞培養(yǎng)增殖。MNV基因組長約7.5kb，為正義單鏈RNA。
小鼠諾如病毒 ( Murine Norovirus, MNV )感染后的影響
大部分實驗小鼠對此病毒易感，雖然普通小鼠受感染無明顯發(fā)病癥狀，但可出現(xiàn)短暫、輕度的生長遲緩。但是實驗小鼠感染了MNV可能對實驗結(jié)果產(chǎn)生一定影響或偏倚，輕則食欲，也可能影響繁殖，特別是免疫缺陷的小鼠感染后可能會導(dǎo)致小鼠死亡。而且可出現(xiàn)按持續(xù)性感染，持續(xù)數(shù)月，通過糞便排毒，引起大范圍感染。
感染后可影響免疫能力，破壞免疫及代謝研究結(jié)果，通過影響基因表達(dá)等因素影響藥效、毒理評估等。
小鼠諾如病毒 ( Murine Norovirus, MNV )的檢測方法
傳統(tǒng)的病毒檢測用 ELISA 的方法檢測病毒抗體，但是由于 ELISA 的方法容易出現(xiàn)抗體交叉反應(yīng)導(dǎo)致出現(xiàn)假陽性，并且對于免疫缺陷小鼠來說無法產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，所以需要有新的檢測方法來完成病毒的檢測。并且核酸病毒的增殖比抗體出現(xiàn)的時間更早，更易于早發(fā)現(xiàn)、早處理。
翼和生物開發(fā)了小鼠諾如病毒的qPCR熒光定量檢測試劑盒，該試劑盒中HEX通道可鑒定樣本是否感染了小鼠諾如病毒MNV。檢測流程：一般采集糞便或者其他樣本，用翼和DNA/RNA共提取試劑盒提取諾如病毒RNA，提取好的核酸直接取樣5微升進(jìn)行上樣檢測。PCR檢測過程中需要設(shè)置陰性對照NTC和陽性MNV對照，確保檢測的流程沒有出現(xiàn)假陽性和假陰性。因為翼和的提取試劑盒中含有內(nèi)參質(zhì)控品（外源基因組），可以質(zhì)控整個提取過程，所以在最終的檢測數(shù)據(jù)中CY5通道可以看到擴增曲線。
該試劑盒靈敏度高，特異性強，成本降低，操作簡單。
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主營產(chǎn)品：主要技術(shù)服務(wù)：細(xì)胞STR鑒定；支原體檢測；細(xì)胞種屬檢測；端粒長度檢測；端粒酶活性檢測等。
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